Yogyakarta secara teratur berada di antara sepuluh provinsi teratas di Indonesia dalam hal kejadian demam berdarah tahunan, selama tiga dekade terakhir. World Mosquito Program dan Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, sejak tahun 2011 telah bekerja sama dengan pemerintah daerah, dinas kesehatan dan masyarakat untuk melakukan uji coba penyebaran Wolbachia di provinsi Yogyakarta. Studi percontohan ini telah menunjukkan keberhasilan dan ketahanan Wolbachia dan tahan lama, dengan dukungan masyarakat yang kuat. Faktor-faktor ini, bersama dengan sistem kesehatan yang kuat dan kapasitas sumber daya manusia untuk penelitian klinis berkualitas tinggi, menjadikannya cocok sebagai lokasi uji coba efikasi pertama metode WMPWolbachia metode ini.

Kemanjuran Wolbachia (strain wMel) terhadap demam berdarah yang dikonfirmasi secara virologis di antara orang berusia 3-45 tahun adalah 77%. Ini berarti bahwa kejadian demam berdarah 77% lebih rendah di antara orang-orang yang tinggal di daerah Wolbachia-dibandingkan dengan mereka yang tinggal di daerah yang tidak diobati selama 27 bulan percobaan. Yang penting, kejadian demam berdarah yang membutuhkan rawat inap adalah 86% lebih rendah di daerah Wolbachia-yang diberi perlakuan dibandingkan dengan daerah yang tidak diberi perlakuan.

Keempat serotipe virus dengue terdeteksi di antara peserta uji coba, dan efikasi perlindungan serupa di seluruh serotipe. Efikasi tertinggi untuk serotipe 2 (84%) dan terendah untuk serotipe 1 (71%).

Cluster Uji Coba Secara Acak Terkontrol dianggap sebagai metode standar emas untuk mengevaluasi efektivitas intervensi kesehatan yang dilakukan di tingkat masyarakat. Metode ini melibatkan alokasi acak suatu intervensi ke subset (misalnya 50%) dari unit spasial yang telah ditentukan sebelumnya, dan perbandingan hasil penyakit di antara individu yang tinggal di daerah dengan dan tanpa intervensi. Alokasi acak dari intervensi menghasilkan dua lengan penelitian, satu diobati, satu tidak diobati, yang sebanding pada awal dalam semua faktor kecuali untuk intervensi yang diteliti. Hal ini memungkinkan estimasi yang tidak bias dari efek intervensi pada penyakit yang diteliti.

Desain uji-negatif berbeda dengan uji acak kelompok tradisional dalam hal cara mendeteksi hasil penyakit. Alih-alih merekrut sekelompok peserta dari komunitas yang diobati dan tidak diobati dan menindaklanjuti mereka dari waktu ke waktu untuk mendeteksi hasil penyakit, desain tes-negatif merekrut peserta dari antara pasien yang datang ke fasilitas kesehatan dengan sindrom klinis tertentu, dalam kasus kami adalah demam, dan menentukan dengan menggunakan tes laboratorium siapa yang positif atau negatif untuk penyakit yang diminati (demam berdarah). Keberhasilan intervensi kemudian ditentukan dengan membandingkan kemungkinan menerima intervensi antara orang yang dites positif dan yang dites negatif. Metode ini lebih efisien, lebih murah dan secara logistik lebih sederhana untuk diimplementasikan dibandingkan dengan metode klaster tradisional Uji Coba Secara Acak Terkontrol karena tidak memerlukan tindak lanjut prospektif terhadap ribuan peserta selama bertahun-tahun untuk mendapatkan jumlah kasus demam berdarah yang cukup untuk analisis statistik yang kuat. Selain itu, karena semua peserta penelitian direkrut dari populasi pasien yang datang ke fasilitas kesehatan, hal ini mengurangi kemungkinan bias yang mungkin timbul dari perbedaan perilaku pencarian layanan kesehatan antara orang yang menerima dan tidak menerima intervensi.

The study area was subdivided into 24 contiguous clusters, each with an area of approximately 1 km2 and an average population of 13,000 people. Among these 24 clusters, 12 were randomly allocated to receive Wolbachia deployments and 12 to remain untreated. This random assignment of the intervention was ‘constrained’ to ensure balance between Wolbachia-treated and untreated areas for some key factors including historical dengue incidence, incidence of non-dengue febrile illnesses, population demographics (proportion aged <15 years, socioeconomic status), population size, and area size. The final random allocation was drawn in a public randomisation event involving community leaders, to maximise transparency and acceptability of the process.

Nyamuk Wolbachia Nyamuk-nyamuk tersebut berasal dari koloni nyamuk yang telah dipelihara di Yogyakarta sejak tahun 2013. Wolbachia Pertama kali diperkenalkan ke dalam nyamuk dari Yogyakarta dengan cara mengawinkan nyamuk Ae. aegypti jantan dari Yogyakarta dengan nyamuk betina Wolbachia yang terinfeksi dari Australia selama 5 generasi. Hal ini disebut persilangan balik (backcrossing) dan berfungsi untuk menggantikan latar belakang genetik Australia dengan latar belakang genetik lokal Indonesia. Persilangan yang sering dilakukan sejak tahun 2013 dengan nyamuk liar lokal memastikan latar belakang genetik nyamuk selalu sesuai dengan nyamuk yang beterbangan di Yogyakarta. 

Wolbachia Nyamuk dilepaskan dalam bentuk telur antara bulan Maret dan Desember 2017. Rumah tangga menjadi tuan rumah bagi wadah pelepasan nyamuk ini, di mana Wolbachia telur nyamuk, air dan makanan ikan setiap dua minggu sekali, selama 4-6 bulan. Nyamuk dewasa Wolbachia dewasa keluar dari kontainer, kemudian dikembangbiakkan dengan nyamuk Ae. aegypti tipe liar hingga hampir semua Ae. aegypti di wilayah intervensi membawa Wolbachia.

Batas-batas alami (jalan, sungai, area non-perumahan) digunakan untuk menentukan batas-batas klaster sebanyak mungkin, untuk membatasi penyebaran spasial Wolbachia penyebaran spasial ke daerah yang tidak diobati. Beberapa kontaminasi pada cluster yang tidak diberi perlakuan memang terjadi, dan ini diperhitungkan dalam analisis sekunder (per-protokol) yang akan dipublikasikan sebagai bagian dari hasil uji coba terperinci dalam jurnal yang telah ditelaah oleh rekan sejawat.

Beberapa kontaminasi Wolbachia Beberapa kontaminasi ke dalam kelompok 'tidak diobati' memang terjadi, yang berarti bahwa beberapa orang yang diklasifikasikan sebagai tinggal di daerah yang tidak diobati mungkin memiliki efek perlindungan parsial dari Wolbachia. Hal ini diperkirakan akan melemahkan efek intervensi yang sebenarnya, yang berarti hasil penelitian kami mungkin meremehkan efek Wolbachiayang sebenarnya terhadap kejadian demam berdarah.

Analisis utama ('niat untuk mengobati') yang menghasilkan hasil kemanjuran 77% mengklasifikasikan peserta sebagai Wolbachia-terpapar atau tidak, berdasarkan apakah tempat tinggal mereka berada di daerah yang menerima Wolbachia yang terpapar atau tidak. Kami mengumpulkan informasi dari peserta pada saat pendaftaran tentang lokasi di mana mereka menghabiskan waktu selama 10 hari sebelum timbulnya penyakit, dari situ kami dapat menentukan proporsi waktu yang mereka habiskan di Wolbachia-yang diobati dan yang tidak diobati.

Efektivitasnya setara dengan analisis sekunder ('per protokol') yang memperhitungkan waktu yang dihabiskan di luar kelompok tempat tinggal, yang menunjukkan bahwa rumah adalah lokasi utama untuk risiko demam berdarah.

Tidak, Wolbachia penyebarannya merupakan tambahan dari kegiatan pengendalian vektor rutin. Tidak ada perubahan yang dilakukan pada kegiatan yang sudah ada, baik di daerah intervensi maupun di daerah yang tidak diintervensi.

Langkah-langkah pengendalian vektor rutin difokuskan pada kegiatan berbasis masyarakat untuk mengurangi tempat perindukan nyamuk, penggunaan larvasida dan fogging insektisida fokal di daerah sekitar kasus yang dilaporkan. Kegiatan-kegiatan ini dikelola di tingkat desa dan pelaksanaannya bervariasi antar masyarakat, tetapi pesan yang disampaikan kepada masyarakat sebelum dan selama uji coba menekankan bahwa praktik-praktik pengendalian vektor dan pencegahan gigitan nyamuk yang biasa dilakukan harus terus dilakukan di seluruh wilayah yang diintervensi dan yang tidak diintervensi.

Sifat dari intervensi Wolbachia intervensi berarti bahwa membutakan mata dianggap tidak mungkin dilakukan, karena akan melipatgandakan sumber daya dan waktu yang dibutuhkan untuk melakukan pelepasan nyamuk di lapangan; misalnya, dengan telur yang tidak aktif sebagai plasebo. Risiko terhadap validitas penelitian dari penyebaran yang tidak dibutakan (misalnya, jika ada keyakinan bahwa Wolbachia bahwa nyamuk yang tidak aktif dapat melindungi dari kasus demam berdarah menyebabkan penduduk di daerah yang diobati cenderung tidak mencari perawatan untuk penyakit demam) juga dapat diminimalisir dengan fakta bahwa kasus demam berdarah dan kontrol negatif diambil dari populasi pasien yang sama, yang secara klinis tidak dapat dibedakan pada saat presentasi dan pendaftaran di klinik. Desain klaster negatif-tes Uji Coba Secara Acak Terkontrol toleran terhadap kemungkinan bahwa perilaku pencarian layanan kesehatan dimodifikasi oleh pengetahuan seseorang tentang status Wolbachia selama perilaku yang dimodifikasi ini berlaku sama untuk kasus dengue dengan hasil tes positif dan kontrol dengan hasil tes negatif.

Upaya ekstensif telah dilakukan dalam pelibatan masyarakat setempat menjelang uji coba ini, mulai dari tokoh masyarakat dan pemangku kepentingan utama hingga media dan masyarakat umum, dengan tujuan untuk menginformasikan kepada masyarakat tentang rencana Wolbachia pelepasliaran yang direncanakan dan mengatasi setiap kekhawatiran. Persetujuan untuk pelepasliaran diberikan oleh para tokoh masyarakat setelah konsultasi ekstensif dengan masyarakat, dengan persetujuan dari setiap penduduk untuk menyelenggarakan Wadah Telur Nyamuk di properti mereka.

Berdasarkan hasil uji coba yang positif, Dinas Kesehatan Kota Yogyakarta bersama dengan World Mosquito Program di Indonesia menyelesaikan Wolbachia di seluruh wilayah yang belum diobati di kota Yogyakarta, pada bulan Januari 2021. Pelepasan sedang dilakukan di kabupaten tetangga, Sleman dan Bantul, provinsi Yogyakarta pada tahun 2021-22. Setelah Wolbachia Setelah program ini dapat bertahan lama di seluruh kota Yogyakarta, dapat dibayangkan bahwa hal ini dapat mengarah pada eliminasi penularan DBD secara lokal di tahun-tahun mendatang, meskipun penemuan kasus dan diagnosis yang lebih baik akan diperlukan untuk melacak kemajuan dan pencapaian tujuan eliminasi.

Keempat serotipe virus dengue terdeteksi di antara peserta uji coba, dan efikasi perlindungan serupa di seluruh serotipe. Efikasi tertinggi untuk serotipe 2 (84%) dan terendah untuk serotipe 1 (71%).

Hasil ini konsisten dengan temuan yang telah dipublikasikan dari penelitian yang dilakukan secara tidak acak di Queensland bagian utara, Indonesia, dan Brasil. Hal ini memberi kami keyakinan bahwa penurunan kejadian demam berdarah yang dilaporkan di sini kemungkinan besar dapat direplikasi di berbagai tempat epidemiologi yang berbeda. Hal ini juga mendukung evaluasi dampak dari penyebaran Wolbachia menggunakan data surveilans penyakit yang tersedia secara rutin, karena tidak mungkin atau tidak perlu untuk melakukan uji coba efikasi formal di setiap Wolbachia penyebarannya kemungkinan besar akan bermanfaat.

Ada kemungkinan bahwa perbedaan dalam dominasi serotipe DENV yang bersirkulasi di lokasi yang berbeda dapat mempengaruhi generalisasi hasil ini ke tempat lain, tetapi secara umum kami berharap bahwa di lokasi lain di mana Wolbachia tingkat tinggi, kita akan melihat penurunan yang sama signifikannya dalam kejadian penyakit arboviral lokal. Memang, di mana Wolbachia penyebaran dilakukan di wilayah yang lebih luas dan berdekatan, kami berharap penurunan beban penyakit akan lebih besar karena sebagian besar pergerakan orang (dan paparan nyamuk) akan berada di dalam area yang diberi perlakuan Wolbachia.

Peringatan utama dalam mereplikasi hasil ini di tempat lain adalah bahwa perbedaan ekologi, iklim, ketinggian dan kompleksitas lingkungan perkotaan kemungkinan besar akan mempengaruhi lintasan Wolbachia pembentukan, dan akibatnya waktu dampak pada penyakit.

Karena efek intervensi yang sebenarnya tidak diketahui, maka interval kepercayaan 95% memberikan rentang nilai yang mungkin. Dalam penelitian ini, estimasi terbaik kami untuk efek intervensi adalah estimasi titik yang dilaporkan sebesar 77%. Jika penelitian ini dapat diulang berkali-kali, kita mungkin akan melihat sedikit variasi dalam setiap estimasi efek intervensi yang sebenarnya dari setiap studi yang diulang karena variabilitas pengambilan sampel. Interval kepercayaan 95% dibuat sedemikian rupa sehingga jika penelitian ini diulang berkali-kali, 95% dari interval yang diestimasi dengan cara ini akan mengandung efek intervensi yang sebenarnya.

Jika Anda ingin menerapkan Wolbachia di kota Anda, silakan kirim email kepada kami di contact@worldmosquito.org dengan informasi tentang Anda, organisasi Anda, dan bagaimana Anda ingin terlibat.